一氧化氮含量(NO)活性試劑盒(硝酸還原酶法)50管/48樣
測定原理
所需的儀器和用品
試劑盒組分與配制
測定意義
NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。
測定原理
NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化變?yōu)橄跛猁}和亞硝酸鹽,通過硝酸鹽還原酶還原硝酸鹽為亞硝酸鹽后,在酸性條件下,亞硝酸鹽—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計算NO含量。
所需的儀器和用品
天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑盒組分與配制
提取液:液體55mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑x1支,-20℃避光保存。臨用前加入0.5mL蒸餾水
試劑二:粉劑x1支,-20℃避光保存。臨用前加入1mL蒸餾水
試劑三:液體30μLx1支,-20℃保存。,臨用前稀釋10倍,避免反復(fù)凍融
試劑四:液體1mLx1支,4℃避光保存。
試劑五:液體60μLx1支,-20℃保存。臨用前稀釋10倍,避免反復(fù)凍融
試劑六:液體3mL×1瓶,4℃避光保存。(如有析出,可以60℃加熱震蕩15min)
試劑七:液體3mL×1瓶,4℃避光保存。(用之前60℃加熱震蕩15min)
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mLx1支,4℃避光保存。(10μmol/mL 亞硝酸鈉)
注意
注意
正式測定前務(wù)必取 3 - 5 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
預(yù)實驗的意義
預(yù)實驗的意義
比色法檢測試劑盒預(yù)實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測,以免造成試劑盒和樣本的浪費(比如低表達(dá)處理的樣本);
2、熟悉生化試劑盒的操作流程,尤其是初次使用生化試劑盒測定;
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數(shù)是否合適;
4、了解實驗過程中可能出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象或問題,以便于及時作出調(diào)整;
5、通過3 - 5組預(yù)實驗,判斷試劑盒對于樣本的最佳適應(yīng)稀釋濃度范圍,指導(dǎo)實驗樣本稀釋比例。
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