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021-54845833/15800441009
ATP活性試劑盒(WST顯色法)微量法/96樣
測定原理
自備實驗用品及儀器
試劑盒組分與配制
測定意義
ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細胞能量代謝狀態的主要參數。測定ATP含量并且計算能荷，能夠反映能量代謝狀態。
測定原理
己糖激酶（HK）催化葡萄糖和ATP生成6-磷酸葡萄糖，后者在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下生成NADPH。NADPH在電子耦合試劑存在下，將WST-8還原為水溶性橙黃色的formazan，該產物在450nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
試劑盒組分與配制
酸性提取液：液體60mL×2瓶，4℃保存；
堿性提取液：液體60mL×2瓶，4℃保存；
試劑一：液體1.5mL×1支，-20℃避光保存；
試劑二：液體 20mL×1瓶，-20℃避光保存；
試劑三：液體1.5mLx1支，-20℃避光保存；
試劑四：液體1.5mLx1支，-20℃避光保存；
標準品：粉劑x1支，-20℃避光保存；(臨用前加入985.8μL蒸餾水配成10μmol/mL的ATP標準溶液，然后稀釋20倍配置成0.5μmol/mL的標準液)
注意
注意
正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定。
預實驗的意義
預實驗的意義
比色法檢測試劑盒預實驗非常重要
1、確定該試劑盒是否適合客戶的樣本檢測，以免造成試劑盒和樣本的浪費（比如低表達處理的樣本）；
2、熟悉生化試劑盒的操作流程，尤其是初次使用生化試劑盒測定；
3、確定樣本的處理方法及稀釋倍數是否合適；
4、了解實驗過程中可能出現的實驗現象或問題，以便于及時作出調整；
5、通過3 - 5組預實驗，判斷試劑盒對于樣本的最佳適應稀釋濃度范圍，指導實驗樣本稀釋比例。
